移液枪有哪些量程规格(100微升用什么移液枪)

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在我们的日常检测和实验室科研中,有很多小仪器看似无关紧要,却是必不可少的,比如移液枪。无论是提取核酸,还是后续加样上机,移液枪就像是我们在微观世界的一双手,协助我们一次又一次完成检测,正确的使用移液枪能保证实验操作的准确性。

本期,小编和大家分享移液枪的原理以及应用。

移液器,又称微量加样器、移液枪,最早出现于1956年,由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明。移液枪是移液器的一种,常用于实验室少量或微量液体的移取,它有各种不同的规格,如单通道移液枪或多通道移液枪。在这两种移液枪下又各自包括不同的量程,如0.1-2.5μL、0.5-10μL、10-100μL、20-200μL、100-1000μL等等。不同规格的移液枪配套使用不同大小的枪头,不同生产厂家生产的形状也略有不同,但工作原理及操作方法基本一致。移液枪属精密仪器,使用及存放时均要小心谨慎,防止损坏,避免影响其量程。

科普丨移液枪的知识小科普

移液枪一般包括控制按钮(不同厂家设计不同,通常也通过此按钮进行吸液体积调节)、吸头推卸按钮、体积显示窗、套筒、弹性吸嘴、吸头。

科普丨移液枪的知识小科普

移液器的实质是一个活塞式吸管,利用空气排放原理进行工作,以活塞套内移动的距离确定移液枪的容量。依据移液模式的不同,可分为内置活塞式移液模式和外置活塞式移液模式。我们日常使用的为内置活塞式移液模式。

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内置活塞式移液模式的吸头大多是通用的,但操作过程中比较容易发生交叉式污染,并且不宜吸取高粘稠度液体、挥发性较大的液体;外置活塞式移液模式中活塞与液体之间没有空气段,活塞为一次性的,对于粘稠度较大的液体,也能实现精确移液,另外,由于无空气间隔,避免了样品接触空气可能发生的气雾交叉污染,因此非常适合是珍贵的试剂、生物样品的移取。

从种类而言,移液器分为单通道加样器、多通道加样器、电子加样器,多通道加样器电子加样器和单通道加样器的原理与上述相同。多通道加样器通常为8通道或12通道,与8X12=96孔微孔板一致。多通道加样器的使用不但可减少实验操作人员的加样操作次数,而且可提高加样的精密度。电子加样器和分配器为半自动加样系统,电子加样器最大的优点是其具有很高的加样重复性,应用范围广。

科普丨移液枪的知识小科普

移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。目前,移液方式分为两种:正向移液和反向移液。

正向移液是日常使用最为常见的方式:将移液枪选择需要的体积刻度,拇指按压移液枪按钮至第一停顿的位置,并将枪头放置于待转移液体的液面下方,缓慢松开按钮。将枪头转移至待放入容器,把按钮按压至第二停顿的位置,即按压到头。

此方法广泛适用于一般的移液过程,包括计量检测等试验均是采用此种方式。

反向移液,与正向移液方式一致,只是在吸液的时候,按钮按压到头,移液枪枪头充满液体,放液的时候按压至第一停顿的位置。

这种方式一般应用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体。其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。

移液六部曲:设定容量值;装枪头;预洗枪头;吸液;排液;退枪头。

设定容量值

操作之前请先选择正确量程的移液枪,在吸头最大量程的35-100%范围内操作可提高操作准确性与重复性。量程调节可分为两步:先进行粗调,通过旋转按钮将体积迅速调整至接近预想值。之后进行细调,将移液枪横置,通过调节按钮慢慢调至预想值。当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程,这样可避免“机械回冲”,确保更高准确性。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。此步骤需注意,在调节枪的过程中切忌超过最大或最小量程,以免损害移液枪的精确度。

装枪头

移液枪顶端插入枪头,套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。注意不可用力敲击吸头。此操作会使枪头损坏,甚至造成移液枪套柄磨损,从而影响其密封性。

预洗枪头

用同一样品重复吸液排液二至三次。对于微量移液器,该操作有助于内壁吸附,并且可以使大量程吸头内部的空气等于样品温度,保证操作的一致性。注意高温或者低温液体请不要润洗。

吸液

先将移液枪排放按钮按至第一停点,再将枪头尽量保持垂直状态浸入液面,保持移液器在与垂直角度成20°范围内。浸入太深会吸入过多的液体;相反,枪头位置过于接近表面会吸入空气;两种操作都会造成吸入量不准确。吸液时保持匀速连贯移液,控制好移液速度。快速或不平稳的吸液会使液体喷溅,产生气雾、套柄污染以及样品损失。吸液后在液面中保持一秒钟再将枪头平缓移开,并轻靠器壁去除枪头外壁挂存的液体。

排液

排液时首先确认枪头内无气泡,枪头尖轻靠容器内壁,排出剩余样品,之后使其沿容器内壁向上滑动,避免液体粘在枪头口上。图九所示另外两种技巧同样适用于水溶(非粘性)液。

退枪头

按动枪头推卸按钮卸掉使用过的枪头。注意与新枪头分开放置,以免发生交叉污染。移液枪使用后调回最大量程。在使用移液枪时也应注意温度对移液准确性的影响。如理想的移液温度是21.5℃(±1℃)。仪器和样品的温度应与工作的室温相同,并且要避开可导致大幅或突然温度变化的通风或阳光照射区域。另外,经过长时间的移液,手上的温度会使移液枪变热,移液枪内部空气膨胀,也会导致结果不准确。因此在两次移液操作之间,应将移液枪放回支架,以避免手温对移液的影响。

1. 影响移液枪精度因素

移液枪属于较为精密仪器,精度(准确性和重复性)是考核一把移液枪是否合格的指标。影响移液枪精度因素主要有以下几点:

(1)试验环境:根据ISO3696中规定,计量环境为20℃、湿度50%、大气压101千帕,使用3级实验室用水。室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差。另外,移液枪的枪头都是类塑料材质,低温或高温,容易使其热胀冷缩,低温溶液枪头收缩,导致转移溶液偏低;反之,高温溶液偏高。

所以,在使用过程中,温度、湿度尽量接近计量温湿度要求。

(2)气密性:尖头和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差。

(3)吸速:容易造成尖头内气泡产生,而且会污染枪头。

(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法:反复抽吸4-5次就可改善。

2. 注意事项

合理科学的操作是保证其准确和精确十分重要的因素。下面是小编为大家汇总的使用移液枪的注意事项。

(1)使用完毕后将移液枪调至最大量程。因为量程调整依靠的是内部弹簧,在最大量程下,弹簧处于相对舒张的状态。而量程越小弹簧越紧,长时间处于紧绷的状态,会极大降低其准确度与精密度。

(2)排液时枪头必须贴在容器壁上,同时移液器在使用过程中保证枪头垂直,这两项并不矛盾,可以参照下图,调整容器角度,保证两者均符合要求。

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(3)润洗会使枪头内壁形成液膜,比不做润洗准确度高很多。

(4)吸液过程一定要慢,且保持在一定的节奏,吸液太快会产生反冲气泡。

(5)从大量程调至小量程时,直接调整;从小量程调至大量程,先调至最大量程再调至需要的量程。

(6)吸液过程中,若插入液面过浅会吸入气泡,但并不是越深越好,太深的话会形成挂壁的液滴,导致转移的容易偏高。可参照下表的建议:

科普丨移液枪的知识小科普

(7)避免试验野蛮操作,快速吸液导致枪体进水,会大大缩短使用寿命。


参考文献:

  • 《移液枪的使用注意事项》,实验助手,唐尧;
  • 《移液枪的那些事》,分析测试百科网
  • 《移液枪的正确使用方法及日常维护》
  • 注:部分图片引自网络,若有侵权,请联系删除。

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